|
Rus
реагенты, оборудование
Лаборатория, анализы | 495 | 589-14-03
Вход для клиентов
Забыли пароль?  |  Регистрация
Главная > О нас > Новости > Революция в лабораторной диагностике вирусного гепатита С

Революция в лабораторной диагностике вирусного гепатита С

Набор ПОЛИГЕП-С БИОТИТР

Набор ПОЛИГЕП-С БИОТИТР – набор для качественного и количественного выявления РНК вируса гепатита С (ВГС, HCV) в сыворотке/плазме крови методом полимеразной цепной реакции.

НАБОР СОСТОИТ ИЗ ДВУХ КОМПЛЕКТОВ:

  • "РНК–ЭКСПРЕСС" - комплект для выделения РНК вируса гепатита С из сыворотки или плазмы крови;
  • "Набор для проведения ОТ-ПЦР" - комплект для проведения анализа методом обратной транскрипции и полимеразной цепной реакции (ОТ-ПЦР).

 

                    

            "РНК–ЭКСПРЕСС"                           "Набор для проведения ОТ-ПЦР"                                       

 ОСНОВНЫЕ ПРЕИМУЩЕСТВА НАБОРА РЕАГЕНТОВ ПОЛИГЕП-С БИОТИТР:

  • Одностадийная процедура выделения РНК не требует выполнения сложных манипуляций;
  • Сокращение продолжительности пробоподготовки позволяет обработать большее количество биопроб за рабочую смену;
  • Отсутствие высокотоксичных реагентов (фенола, хлороформа, меркаптоэтанола, изопропилового спирта) обеспечивает полную безопасность процедуры пробоподготовки для персонала;
  • Существенное снижение расхода лабораторного пластика;
  • Перед постановкой ОТ-ПЦР выделенная РНК не нуждается в обработке ДНК-азами, так  как  в процессе выделения РНК не выделяется вирусная и человеческая ДНК;
  • РНК полностью готова для последующей постановки ОТ-ПЦР;
  • Низкая себестоимость процедуры пробоподготовки позволяет снижать себестоимость диагностического теста;
  • Одновременное проведение реакции обратной транскрипции и полимеразной цепной реакции позволяет существенно сократить общее время исследования
  • Общее время анализа, включая процедуру пробоподготовки, не превышает 2 ч 20 мин;
  • Надежность количественного определения вирусной нагрузки по 4-м стандартным калибровочным пробам;
  • Специфичность праймеров к наиболее консервативным участкам генома ВГС позволяет одновременно выявлять РНК ВГС разных генотипов;
  • Выделение РНК без ДНК в ходе пробоподготовки и высокая надежность специфичности исследования позволяет выявлять только вирус гепатита С и полностью исключает перекрестные реакции с другими микроорганизмами;
  • Флуоресцентная детекция результатов реакции ОТ-ПЦР в ходе определения РНК ВГС обеспечивает максимальную защиту от контаминации клиничесих проб и лабораторного помещения продуктами реакции амплификации и, следовательно, от ложноположительных результатов.

ОСНОВНЫЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ НАБОРА РЕАГЕНТОВ ПОЛИГЕП-С БИОТИТР:

  • Метод выделения РНК ВГС – перейти к описанию комплекта "РНК ЭКСПРЕСС";
  • Метод  определения РНК ВГС. РНК ВГС в сыворотке/плазме крови определяется методом обратной транскрипции и полимеразной цепной реакцией (ОТ-ПЦР) с флуоресцентной детекцией  в режиме реального времени (FRT);
  • Принцип ОТ-ПЦР. Реакция обратной транскрипции - полимеразной цепной реакции (OT-ПЦР) является вариантом ПЦР, позволяющая получать многочисленные копии ДНК, комплементарной искомому фрагменту РНК. Первой стадией OT-ПЦР является реакция обратной транскрипции: синтез на матрице РНК комплементарной ДНК (кДНК) с помощью фермента обратной транскриптазы. В дальнейшем в результате классической полимеразной цепной реакции в ходе многократной амплификации происходит накопление искомого фрагмента кДНК;
  • Принцип FRT. Принцип действия наборов реагентов основан на использовании метода ПЦР для определения специфических участков РНК возбудителей путем накопления (амплификации) специфических фрагментов;
  • Характеристика флуоресцентных зондов. Зонд  для специфического фрагмента содержит флуорофор FAM (λ поглощения  – 494; λ испускания  –  520); зонд для внутреннего контроля содержит флюорофор HEX (λ поглощения  – 535; λ испускания – 553). Особая структура зонда класса Pefect Probe позволяет достигать максимального разрешения метода флуоресцентной детекции за счет максимальной разницы между фоновым и специфическим сигналом;
  • Чувствительность определения РНК ВГС. С помощью набора ПОЛИГЕП-С БИОТИТР можно обнаружить 103/мл  и более копий РНК вируса гепатита С в сыворотке или плИзме крови, что соответствует 370 МЕ/мл в соответствии со Вторым международным стандартом ВОЗ (WHO)  для тестов, выявляющих РНК  ВГС (NIBSC 96/798);
  • Специфичность. Специфичность определяется олигонуклеотидными затравками (праймерами), подобранными к наиболее консервативным участкам генома (5’ нетранслируемая область) среди всех известных генотипов ВГС, а также специфичными флуоресцентными олигонуклеотидными зондами, комплементарно гибридизирующимися только со специфическими продуктами амплификации – точными копиями искомого фрагмента консервативного участка РНК ВГС;
  • Характеристики количественного определения РНК ВГС. Зависимость концентрации РНК ВГС в образцах сыворотки/плазмы крови при разведении их сывороткой/плазмой крови, не содержащей РНК ВГС, имеет линейный характер в диапазоне концентраций 103 - 106 копий РНК ВГС на мл и составляет ±10%. Надежность количественного определения вирусной нагрузки обеспечивается параллельным определением титра вируса в 4-х стандартных калибровочных пробах.
  • Калибровочные пробы представляют собой защищенную неинфекционную РНК в растворе TE-буфера, несущую фрагменты последовательности вируса гепатита С и содержат известные количества РНК (103, 104, 105 и 106 копий РНК ВГС/мл).

КОМПЛЕКТ РЕАГЕНТОВ ДЛЯ ВЫДЕЛЕНИЯ РНК "РНК ЭКСПРЕСС"

Комплект представляет собой реагент в пробирках для выделения РНК из биопроб с целью последующего анализа методом обратной транскрипции и полимеразной цепной реакции (ОТ-ПЦР).

Подготовка клинического материала к постановке реакции обратной транскрипции и полимеразной цепной реакции (ОТ-ПЦР) с целью выявления РНК-содержащих вирусов в диагностических целях проводится с применением метода термо-коагуляционного кондиционирования РНК.

ПРЕИМУЩЕСТВА "РНК-ЭКСПРЕСС" В СРАВНЕНИИ С ДРУГИМИ НАБОРАМИ

Критерий сравнения «РНК-ЭКСПРЕСС» Метод фенол-хлороформной экстракции
Состав набора Готовый раствор, расфасованный в пробирки
  • Денатурирующий раствор
  • Изопропиловый спирт
  • Раствор носителя (т-РНК)
  • Промывочный раствор
  • Деионизированная вода
  • Хлороформ
Принцип выделения  Термо-коагуляционного кондиционирования РНК  Двухфазное разделение
 Полнота выделения  РНК из образца  Близкая к 100%.
РНК полностью остается в растворе, так как нет разделения и переноса фаз
 Нестабильный процент выхода РНК вплоть до ложноотрицательных результатов при случайном засасывании микроосадка РНК со дна пробирки в процессе промывки
Влияние посторонних примесей в пробе  В процессе выделения РНК не происходит выделения ДНК. Не требуется добавлять ДНК-азы  Одновременно с РНК выделяется ДНК. Добавление ДНК-аз обязательно
 Защита от перекрестной контаминации от «пробы к пробе» и возможной контаминации продуктами ПЦР  Практически полная защита, так как пробирка после внесения биологического материала ни разу не открывается, не требуется добавлять дополнительные реагенты  Высокий риск контаминации поверхностей и проб во время аэрозольного разбрызгивания в процессе большого количества манипуляций
 Защита персонала лаборатории  При сохранении целостности пробирки гарантируется практически полная защита персонала лаборатории от инфекционного агента  Персонал лаборатории подвергается риску заражения инфекционным агентом и вредному воздействию гепатотропных токсичных реактивов
 Стадии выделения РНК  1 стадия – прогревание при 90°С  15 стадий
Стадии общей процедуры пробоподготовки  3 стадии:
  • перемешивание (вортексирование)
  • погревание
  • центрифугирование
 20-25 стадий (в зависимости от модификации метода)
 Время на обработку 100 проб  30 мин  2-2,5 часа
 Расход лабораторного пластика Существенно снижается расход лабораторного пластика Требуются дополнительные пробирки и наконечники из-за необходимости переноса разделенных фаз
Необходимость наличия вытяжного шкафа  Не требуется  Обязательно наличие вытяжного шкафа из-за высокой токсичности фенола и хлороформа

 

КОМПЛЕКТ ДЛЯ ПРОВЕДЕНИЯ ОТ-ПЦР

КОМПЛЕКТ ДЛЯ ПРОВЕДЕНИЯ ОТ-ПЦР - набор для качественного и количественного выявления РНК вируса гепатита С (ВГС, HCV) всех генотипов в сыворотке/плазме крови с диагностическими целями при лабораторной диагностике вирусного гепатита С методом полимеразной цепной реакции.


КЛИНИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ ДЕТЕКЦИИ РНК ВГС С ПОМОЩЬЮ КОМПЛЕКТА
ДЛЯ ПРОВЕДЕНИЯ ОТ-ПЦР

  • Диагностическое подтверждающее исследование положительного результата серологического тестирования на антитела к ВГС (anti-HCV)
  • Диагностическое подтверждающее исследование у серонегативных лиц
  • Ранняя диагностика вирусного гепатита С
  • Определение показаний к назначению противовирусной терапии
  • Контроль эффективности противовирусной терапии
  • Контроль перинатальной передачи вируса гепатита С

СОСТАВ НАБОРА РЕАГЕНТОВ ПОЛИГЕП-С БИОТИТР:

А. Комплект для выделения РНК ВГС « РНК-ЭКСПРЕСС»

Состав Комплектация

Реагент РНК-ЭКСПРЕСС

110 пробирок (по 200 мкл)

Положительный контрольный образец 5 пробирок (по 300 мкл)
Отрицательный контрольный образец 5 пробирок (по 300 мкл)

 Б. Набор реагентов для постановки реакции ОТ-ПЦР FRT

Формат
Маркировка
Состав Комплектация
 Формат
качественный
  1. Реакционная смесь    1 пробирка (1500 мкл)
  2. Taq-полимераза    1 пробирка (100 мкл)
  3. Обратная транскриптаза    1 пробирка (30 мкл)
  4. Разбавитель    1 пробирка (по 2 мл)
  5. Дитиотрейтол (DTT)    1 пробирка (30 мкл)
  6. Ингибитор рибонуклеаз    1 пробирка (70 мкл)
  7. Положительный контроль ПЦР    2 пробирки (по 45 мкл)
 Формат
количественный
  1. Реакционная смесь    1 пробирка (1500 мкл)
  2. Taq-полимераза    1 пробирка (100 мкл)
  3. Обратная транскриптаза    1 пробирка (30 мкл)
  4. Разбавитель    1 пробирка (по 2 мкл)
  5. Дитиотрейтол (DTT)    1 пробирка (30 мкл)
  6. Ингибитор рибонуклеаз    1 пробирка (70 мкл)
  7. Калибровочная проба 103 копий РНК/мл    2 пробирки (по 45 мкл)
  8. Калибровочная проба 104 копий РНК/мл
  9. Калибровочная проба 105 копий РНК/мл
 10.Калибровочная проба 106 копий РНК/мл

 

Скачать инструкцию по применению


Скачать прайс-лист Скачать прайс-лист
Лицензии. Сертификаты. Регистрационные удостоверения Лицензии. Сертификаты. Регистрационные удостоверения
Поликлиника НИИ Физико-химической медицины Поликлиника НИИ Физико-химической медицины
НИИ Физико-химической медицины НИИ Физико-химической медицины
Медицинские анализы Медицинские анализы www.analyz24.ru
О нас  | 
© Литех 1992-2017.
Разработка сайта - InterLabs.